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Die Penisspitze des Mannes oder die Harnröhrenöffnung bei der Frau wird in der Regel mit einem kleinen antiseptischen Pad gereinigt. Nicht beschnittene Männer sollten ihre Vorhaut zurückziehen, um die Penis-Eichel zu reinigen.
Die ersten Urintropfen, die die Harnröhre auswaschen, werden nicht aufgefangen.
Der danach folgende Urin wird in einem sterilen Becher aufgefangen. In der Regel ist die Probe ausreichend, bereits bevor die Blase vollständig entleert wurde (Mittelstrahlurin).