免疫学检测使用以下方法之一:
抗原检测患者标本中的病原体抗体
抗体 检测患者标本中病原体的抗原
标本的处理方法各不相同,但如果不能立即进行检验,标本通常应被冷藏或冷冻起来,以防止细菌污染物过度生长。
凝集反应实验
在凝集试验(如乳胶凝集反应、共凝集反应)中,很小的微粒(乳胶粒、明胶颗粒或细菌)与试剂抗原或抗体发生偶联。 剂发生偶联,再将该复合微粒与样本(如脑脊液、血清)混合;如果在样本中存在目标抗原或者抗体,可以与微粒交联,即发生可以检测的凝集反应。
如果试验结果显示阳性,将体液标本进行连续的稀释并检测。使用大量的稀释液后仍发生凝集反应说明原目标抗原或者抗体的浓度较高。 滴定度是用发生凝集反应时使用的最大稀释液量的倒数来定义的;如32表示液体稀释至起始浓度的1/32时最终可发生凝集反应。
一般来说,凝集反应与其他许多方法相比速度较快,但是灵敏度较差。该法亦可用于测定一些细菌的血清型。
补体结合
补体结合试验是测量在血清或CSF中使得补体消耗的(补体固定的)抗体水平。这项试验用于诊断一些病毒和真菌的感染,尤其是 球孢子菌病 诊断 球孢子菌病是由粗球孢子菌和 Coccidioides immitis 和C. posadasii引起的肺部或血流播散所致播散性疾病,常表现为急性良性无症状或自限性的呼吸系统感染。可偶尔播散至其他组织产生这些组织的局灶性病变。球孢子菌病如果出现临床症状,则表现为下呼吸道感染或轻度非特异性播散性疾病。临床和流行病学特征提示本病可能,进而通过胸部X线检查、真菌培养以及血清学检查加以确诊。球孢子菌病如果需要治疗,则通... Common.TooltipReadMore 。
将样本和一定量的补体与抗原一起培养,然后测定目标抗体。补体固定的程度表明样本中这一抗体的相对含量。
试验可以测定IgM和IgG抗体的滴定度,或者可以改良后用于测定相应的抗原。试验是精确的,但是具体应用因为工作量大以及需要大量的对照而受到限制。
酶免疫测定
酶免疫测定试验是用与酶连接的抗体去测定抗原、抗体,并且可以确定抗体的量的方法。例子
酶免疫法(EIA)
酶联免疫吸附试验(ELISA)
由于大多数酶免疫测定试验的敏感性高,因此它们常常用于进行筛选试验。可以通过类似于凝集反应试验中的连续稀释样本的方法来测滴定度。
试验的灵敏度虽然一般都较高,但是有时可以因为患者的年龄、微生物的血清型、或者是疾病所处的临床阶段等因素影响而变化。
沉淀试验
沉淀试验是通过对凝胶(琼脂糖)中或者在液体中抗原-抗体复合物所形成的沉淀进行测定,从而确定体液中是否含有抗原或者抗体。 沉淀试验有许多种类(如,ouchterlony双扩散,计数免疫电泳),但是这些试验的应用都极为有限。
通常将血液样本与抗原试剂混合来测定患者的抗体,最常应用于可疑真菌感染或者化脓性脑膜炎。由于取得阳性结果需要大量的抗体或者抗原,因此灵敏度不高。
蛋白印迹(Western blot)法
蛋白印迹法是通过与目标抗原(如病毒成分)反应后在膜上形成斑点,从而测定患者样本(如血清或其他体液)中的抗微生物抗体。
蛋白印迹有很高的灵敏度,虽然常常不如筛查试验(比如ELISA)的特异度高,但是仍具有较高的特异度。因此,此项试验常用于在筛选试验得到阳性结果后进行进一步确认。
蛋白印迹法的技术修改是
线免疫分析法(LIA)
使用合成或重组产生的抗原的重组免疫印迹分析(RIBA)
可以快速筛选标本中特定微生物抗原或患者抗体的免疫色谱分析
在这三种之中,免疫层析法是最容易操作并且最常用的 - 例如,可以检测 产生志贺毒素的微生物 Escherichia coli O157:H7及其他肠出血 E. coli (EHEC)引起的感染 革兰阴性大肠埃希杆菌 Escherichia coliO157:H7和其他肠出血大肠埃希杆菌E. coli(EHEC)引起典型的急性血性腹泻,可以引起溶血尿毒综合征。表现为腹部痉挛疼痛和腹泻,可引起大出血。发热不明显。通过粪便培养和毒素检测诊断。应予支持治疗,不推荐使用抗生素。 肠出血性大肠杆菌包括 >100种血清型,可以产生志贺和志贺样毒素(产志贺毒素大肠杆菌E... Common.TooltipReadMore , 新型隐球菌(Cryptococcus neoformans 诊断 隐球菌病是人体吸入被新生或格特隐球菌污染的尘土所引起的肺部或播散性感染性疾病Cryptococcus neoformans or C. gattii。临床上出现肺炎、脑膜炎的相应症状或由皮肤、骨骼或内脏受累及所出现的相关症状。临床上结合临床表现以及显微镜检查结果进行诊断,再通过真菌培养或组织染色加以确认。如果需要治疗,则使用唑类抗真菌药物或两性霉素B,加或不加用氟胞嘧啶进行治疗。... Common.TooltipReadMore ) 荚膜抗原,以及 流感病毒 诊断 流感是一种 由病毒引起的急性呼吸道感染,可引起发热、鼻炎、咳嗽、头痛、全身不适等症状。 在大流行期间该病可以导致死亡,尤其是高危人群(如:高龄、心肺功能不全或晚期妊娠的孕妇)。在大流行期间,即使是健康的青年患者也可能会死亡。 诊断依据当地疫情和临床来判断。 年龄≥ 6 个月且没有禁忌症的所有人应每年接种流感疫苗。 抗病毒治疗大概能够缩短1天的病程。对于有高危患者应当考虑进行抗病毒治疗。... Common.TooltipReadMore 。