培养是指微生物在一种有营养的固体或液体培养基上面或里面生长,使得微生物的数量增加从而更利于鉴定。培养也可以更加容易进行抗微生物制剂敏感性试验。
临床和实验室进行交流是必要的。虽然大多数标本都接种于普通培养基上(如血琼脂或巧克力琼脂),但是一些病原菌的培养需要含特殊营养成分和抑制剂(见表)或需要其他特殊的孵育条件(如特定的温度、氧气或二氧化碳浓度或持续时间)。如果怀疑是其中一种需要复杂营养的挑剔病原体,或者患者一直在服用抗菌药物,则应建议实验室检测。告知实验室标本的来源有利于实验室根据特殊部位常见的菌群区分病原菌。
标本采集
标本的采集非常重要。在感染性疾病的诊断中,在感染部位采集标本是主要原则。对于皮肤病变,应该对前缘进行采样,而不是中心进行采样。
拭子的使用令人气馁。然而,如果需要使用一个拭子,植绒拭子应该被优先选,因为它可以获取更多的标本。用于 分子学检测 以核酸为基础的鉴定方法 以核酸为基础的方法是测定从微生物中提取的微生物特异性DNA或RNA序列。序列在体外可以或者不可以被扩增。 基于核酸(分子)的鉴定方法在临床应用已越来越普遍;由此产生的快速鉴定结果可使患者能够接受特定的抗菌治疗,从而避免因经验性治疗或潜在的不合理用药导致疗程延长。 以核酸为基础的方法通常具有高特异度、高灵敏度,可用于检测所有种类的微生物,并可快速提供结果。结果能够快速得到。因为每个检测通常是针对特定的微生物,临床医师必须知道可能的诊断以此... Common.TooltipReadMore 方法的拭子必须与它们所用的特定检测方法相匹配。选择错误类型的拭子可产生假阴性。木制杆状拭子对某些病毒有害。棉签对于包括衣原体在内的一些细菌是有毒的。
血培养 标本采集时需要对皮肤进行清洁和消毒(如聚维酮碘药签消毒、干燥,再用70%的乙醇脱碘)。常常需要从多个不同的部位留取多份样本,如果可能应该在发热达到高峰时留取标本。仅仅在一份血样本中有皮肤常见菌群生长说明是污染造成的。
如果一份血液样本是从深部留置管获得,那么也应该再留取一份外周血管血液标本,这样有助于区分是全身性的菌血症还是导管相关性感染。来自感染导管中的标本培养结果与同时来自外周血管的血标本培养结果相比较,通常阳性结果出现较快,并且包含有较多种微生物。 部分真菌,特别是霉菌(如Aspergillus 类),通常不能通过血培养获得。
为了尽量限制可能造成污染的正常菌群的生长,样本必须以最快的速度接种于适宜的培养基中。为了精准确定病原体的数量,应尽量防止其他病原体的生长;应该立即将样本运送至实验室,若可能耽误接种,则可先将样本进行冷冻(在多数情况下)。
对培养的特殊考虑
某些病原培养需要特殊的条件。
厌氧菌 厌氧菌 厌氧菌根据不同的O2依赖和耐受程度可以分为: 兼性厌氧菌:有O2及无O2均可生长; 微需氧:需低氧浓度(通常为2% - 10%),对于多数细菌而言需要高二氧化碳浓度(如10%);在无氧环境中生长缓慢。 专性厌氧菌:无法进行有氧代谢,但对O2耐受程度不一。... Common.TooltipReadMore 不应该从正常菌群的部位留取样本进行培养,因为不可能做到从正常菌群中区分出病原菌。样本必须隔绝空气,做到该点颇为困难。对于用拭子采集的样本,可以利用厌氧培养基运送。 然而,对于厌氧菌的培养,液体标本(如脓肿内容物)优于拭子标本。液体标本应该用排空空气的注射器收集(以尽可能减少标本与氧气的接触),装在注射器(去除针头并盖好针帽)或转移至厌氧菌瓶中送到实验室。
分枝杆菌 (TB) 结核 结核病是一种慢性进行性分枝杆菌感染,通常在最初感染后有无症状潜伏期。肺结核最常见于肺部。表现为咳嗽、咳痰、发热、消瘦及乏力。最常见的诊断方法是痰涂片和培养,如果可以,还可以通过核酸扩增检测。抗结核治疗需联合用药至少4个月。 (另请参阅 围产期结核病... Common.TooltipReadMore 属培养有相当困难。 含有正常菌群的样本必须首先进行去污和浓缩。Mycobacterium tuberculosis结核分枝杆菌和一些其他的分枝杆菌生长缓慢。结核分枝杆菌 M. tuberculosis 通常在液体培养基中生长的速度在比在固体培养基中快;常规使用含液体培养基的自动化系统可能在2周内的生长,≥在固体培养基上(如Lowenstein-Jensen琼脂)的4周培养时间。此外,在样本中可能只含有极微量的微生物。同一部位留取多份样本有助于最大限度获得阳性结果。在将标本丢弃前应该给予8周时间进行培养。导致 布鲁氏溃疡 皮肤感染 的溃疡分枝杆菌需要在32°C的Lowenstein-Jensen琼脂上培养12周。若怀疑为非常见的分枝杆菌,事先应该告知实验室。
病毒 诊断 病毒是最小的寄生虫,通常从0.02到0.3 μm,虽然最近发现几个非常大的病毒可达1 μm(百万病毒,潘多拉病毒)。病毒的复制完全是依赖于细胞(细菌,植物或动物)。一些病毒有一个由蛋白质和脂质组成的外膜,包围着蛋白质衣壳复合物,其中含有基因组... Common.TooltipReadMore 通常将来自拭子和组织的标本接种于含有抗细菌和抗真菌物质的培养基中培养。将标本接种于组织培养物上,该培养物支持可疑的病毒生长而抑制所有其他微生物生长。 病毒(如水痘带状疱疹)具有高度的不稳定性,应该在采集后1小时内接种于组织培养物上。标准的组织培养是最敏感的。贝壳瓶培养技术(标本在小瓶内离心到单层细胞上)提供了更快的结果(2天对比7~14天)。一些常见病毒无法使用常规培养方法检测到,需要其他诊断方法(见表),如下所示:
酶免疫法 酶免疫测定 免疫学检测使用以下方法之一: 抗原检测患者标本中的病原体抗体 抗体 检测患者标本中病原体的抗原 标本的处理方法各不相同,但如果不能立即进行检验,标本通常应被冷藏或冷冻起来,以防止细菌污染物过度生长。 在凝集试验(如乳胶凝集反应、共凝集反应)中,很小的微粒(乳胶粒、明胶颗粒或细菌)与试剂抗原或抗体发生偶联。 剂发生偶联,再将该复合微粒与样本(如脑脊液、血清)混合;如果在样本中存在目标抗原或者抗体,可以与微粒交联,即发生可以检测的凝集反应。 Common.TooltipReadMore 检测 EB病毒 诊断 传染性单核细胞增多症病因为EB病毒(人类疱疹病毒4型)感染,其特征是疲劳、发热、咽炎和淋巴结肿大。发热可持续数周或数月。作为严重的并发症,呼吸道阻塞,脾破裂和神经系统症状偶可发生。其诊断可根据临床表现或EB病毒血清学抗体实验。治疗主要以对症支持为主。 50%的5岁以下儿童感染过EB病毒。90%以上的成人血清成阳性。人类是EB病毒的唯一宿主。 EB病毒感染通常无症状。 见 疱疹病毒... Common.TooltipReadMore 、 乙型肝炎病毒 诊断 乙型肝炎通常是由非肠道传染的DNA病毒引起的。它引起病毒性肝炎的典型症状,包括厌食,不适,和黄疸。可发生暴发性肝炎和死亡。慢性感染可导致肝硬化和/或肝细胞癌。诊断是通过血清学检测。采用支持治疗。接种疫 苗具有保护作用,暴露后使用乙肝免疫球蛋白可预防或减轻临床疾病。 (也见 肝炎的原因, 急性病毒性肝炎概述, 和 慢性乙型肝炎.) 乙型肝炎病毒(HBV)是有最完全特征的和复杂的肝炎病毒。传染性颗粒包括病毒核心和衣壳。核心由环状双股DNA和... Common.TooltipReadMore 和 戊型肝炎病毒 诊断 戊肝由肠道传染的RNA病毒引起的,导致病毒性肝炎典型症状,包括厌食,不适,和黄疸。除了妊娠期间,暴发性肝炎及死亡罕见。通过抗体检测明确诊断。 除非发生慢性感染,否则治疗是支持性的。 也见 病毒的病因和 急性病毒性肝炎概述。 戊型肝炎病毒(HEV)有4种基因型所有基因型都能够引起急性病毒性肝炎。 基因型1和2引起水源性的爆发,通常与供水被粪便污染和粪口人到人的传播相关。疫情曾发生在中国,印度,墨西哥,巴基斯坦,秘鲁,俄罗斯,以及非洲中部和... Common.TooltipReadMore 、 艾滋病毒 诊断 由人免疫缺陷病毒(HIV)的两类相似的反转录病毒(HIV-1和HIV-2)感染引起CD4+T细胞损伤和细胞免疫功能破坏,进而导致发生某些感染和肿瘤的危险性增加。最初的感染可能导致不典型的发热性疾病。之后,由HIV感染所带来的疾病风险取决于免疫缺陷的程度,也即CD4+T淋巴细胞的减低程度。病毒可直接损... Common.TooltipReadMore 和人类T淋巴细胞病毒
甲型肝炎病毒 诊断 甲型肝炎是由肠道传播的RNA病毒引起的,在年龄较大的儿童和成人产生病毒性肝炎的典型症状,包括食欲不振,全身乏力,黄疸。幼儿可无症状在拥有充足和有效的水处理和卫生设施的国家,暴发性肝炎和死亡很少见。本病不引起慢性肝炎。抗体检测可明确诊断。采用支持治疗。疫苗接种和既往感染具有保护性。 也见 肝炎的病因和 急性病毒性肝炎概述 甲型肝炎病毒(HAV)是单链RNA小核糖核酸病毒。它是急性病毒性肝炎... Common.TooltipReadMore 和 丁型肝炎病毒 诊断 HDV是一种RNA缺陷病毒(delta成分),必须在HBV存在时才能复制。因此HDV感染仅在与急性乙肝联合感染或慢性乙肝重叠感染时发生。 (参见 肝炎的病因和 急性病毒性肝炎概述、《 慢性肝炎概述》) 丁型肝炎通常是通过与受感染的血液或体液在肠胃外或粘膜接触传播。感染肝细胞包含HBsAg包被的delta颗粒。 丁型肝炎患病率存在很大的地域差异,在某些国家流行。肠外用药者的风险相对较高,但与乙型肝炎病毒(HBV)不同,HDV在MSM(男男... Common.TooltipReadMore 的血清学检测
基于核酸的方法 以核酸为基础的检测法 药敏试验是通过将一种微生物浓缩后使其与特定的经过浓缩的抗微生物药物接触,以确定该抗微生物制剂针对该种微生物的易损性。药敏试验可用于细菌、真菌和病毒。对于一些微生物来说,通过对一种药物所获得的结果可以预测与其类似药物的试验结果。因此,无需对所有的现存药物都进行试验。 药敏试验在体外进行,因此在体内可能影响治疗成功与否的因素没被考虑在内(如药效学和药代动力学、特定部位的药物浓度、宿主的免疫状态、特定部位宿主的自我防御机制)。因此,药敏试验的... Common.TooltipReadMore 检测 艾滋病病毒 诊断 由人免疫缺陷病毒(HIV)的两类相似的反转录病毒(HIV-1和HIV-2)感染引起CD4+T细胞损伤和细胞免疫功能破坏,进而导致发生某些感染和肿瘤的危险性增加。最初的感染可能导致不典型的发热性疾病。之后,由HIV感染所带来的疾病风险取决于免疫缺陷的程度,也即CD4+T淋巴细胞的减低程度。病毒可直接损... Common.TooltipReadMore , 流感 流感 流感是一种 由病毒引起的急性呼吸道感染,可引起发热、鼻炎、咳嗽、头痛、全身不适等症状。 在大流行期间该病可以导致死亡,尤其是高危人群(如:高龄、心肺功能不全或晚期妊娠的孕妇)。在大流行期间,即使是健康的青年患者也可能会死亡。 诊断依据当地疫情和临床来判断。 年龄≥ 6 个月且没有禁忌症的所有人应每年接种流感疫苗。 抗病毒治疗大概能够缩短1天的病程。对于有高危患者应当考虑进行抗病毒治疗。... Common.TooltipReadMore , 呼吸道合胞病毒 (RSV) 呼吸道合胞病毒(RSV) 和人偏肺病毒 呼吸道合胞病毒和人偏肺病毒感染会导致季节性的下呼吸道疾病,尤其是在婴儿和儿童患者中。疾病可以表现为无症状型、轻型和重型,包括肺炎和气管炎。诊断通常依靠临床表现,也可以通过实验室来确诊。治疗一般都为支持治疗。 呼吸道合胞病毒是一种RNA病毒,是肺炎病毒类。已经确定了A和B两个分组。 呼吸道合胞病毒是婴幼儿下呼吸道疾病的最常见原因,在美国,5岁以下儿童每年住院人数>50,000例。... Common.TooltipReadMore , SARS-CoV-2 COVID-19 COVID-19 是一种由新型冠状病毒 SARS-CoV-2 引起的急性、有时是严重的呼吸道疾病。预防是通过疫苗接种、感染控制预防措施(例如,戴口罩、洗手、保持社交距离、隔离感染者)实现的。通过抗原或PCR(聚合酶链反应)检测上呼吸道或下呼吸道分泌物进行诊断。治疗采用支持性护理、抗病毒药物或皮质类固... Common.TooltipReadMore
必须将真菌样本接种于含有抗细菌物质的培养基上。在被视为阴性并丢弃之前,应允许样本生长3至4周。